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当Alastair Khodabukus试着在美国加州大学戴维斯分校新试验室制作肌肉纤维时，他发现一些怪异的重大正试使命：这些机关在痉挛。数年来，差距从往他不断在用同样的将修鼠源克隆技术哺育纤维，但这些却与众差距。验服与以前他在英国邓迪的事迷试验室哺育出的纤维比照，它们需要更多的血清信网葡萄糖，而搜罗的重大正试能增长更快放松及不易疲惫的卵白质更少。Khodabukus以为，差距从往这些差距归因于美国牛的将修饲养方式差距。

大少数大学试验室接管牛胎儿血清（FBS）哺育细胞。验服牛的事迷饮食、地舆位置、血清信网年纪、重大正试是差距从往否运用激素或者抗体，以及牛胎儿孕周等均会发生影响。FBS被作为哺育基的填补物，它能影响做作机关的厚度，并能使产物模拟细胞行动，致使影响概况接受器对于给定化合物的照应。

“FBS就像拆穿困绕在头上的乌云，咱们不知道它实际是甚么或者不是甚么。”Khodabukus说。

而血清只是钻研职员在钻研细胞时需要思考的诸多因素之一。在去年召开的美国国立卫生钻研院（NIH）细胞哺育以及再生钻研会上，生物制药公司“祥瑞德迷信”的癌症生物学家Richard Neve就耽忧，钻研职员将变患上不胜重负。“良多试验室面临大批下场。”

艰深而言，相关钻研的最根基步骤是确保细胞的基因不同性。而且，细胞行动也会受到浓度、增殖率、哺育基、传染物以及哺育光阴等的影响。而血清是细胞哺育基中最罕有的填补物，并至少应坚持不同。个别，人类血清搜罗数千差距的卵白质以及小份子。而FBS重大性相似，且富含反对于胎儿快捷妨碍的物资。

自动于研发血清替换物的Essential制药公司的首席迷信馆Adam Elhofy展现，在血清中，大部份细胞并不与血液直接打仗，而是被液体包裹着。“血清里还富含荷尔蒙、妨碍因子以及其余信号份子。”

走向无血清

为了克制拦阻，试剂公司已经开拓出无血清哺育基。迷信家也在谋求“生物工艺”的运用，好比，药用卵白质以及疫苗的破费。而那些清晰细胞对于哺育条件重大变更颇为敏感的干细胞钻研者也对于此颇为热衷。

出于对于不同性的耽忧以及增长转化医学的愿望，越来越多的钻研者开始留意若何看待他们的细胞。MilliporeSigma 公司钻研部策略营销主管Ken Yoon展现，这些都在鼓舞迷信家远离血清。

但无血清哺育基并非总是可行的或者实际的。“假如咱们能再也不用FBS，而是有一些更判断的工具，所有人都拥护这是件小事。”美国国家综合医学迷信钻研所Jon Lorsch说，“下场是这有多适宜实际？咱们不知道谜底。”

大部份无血清剂型只针对于特定细胞规范或者相关细胞系群。好比，提供商为中国仓鼠卵巢细胞提供无血清哺育基。但ScienCell试验室研发副总监Jennifer Welser-Alves指出，这些哺育基并不适用于所有细胞规范：良多原始细胞被移出后，仍需要血清能耐妨碍。“你能做的削减细胞并坚持其削减的所有使命都是需要的。”她说。一些哺育基要求削减至少2%的FBS，低剂量的血清有助于削减可变性。

不外，芒特普林森的哺育基照料Paul Price指出，纵然具备可行性，良多钻研者也不愿望破费时偶尔冒着危害，掐断细胞的血清提供。“自1980年以来，人们不断说血清将成为历史，但到如今它依然盛行。”

此外，Khodabukus提到，骨骼肌纤维尚不商用哺育制剂。他破费两年光阴更正了配方，散漫了数十种妨碍因子以及其余信号份子。但当纤维的功能随差距血清泛起变更时，打乱了他的钻研妄想。“我妄想用尔后所有光阴钻研这一规模，假如能乐成，则将能用于全天下每一个试验室。”

无奈解脱的血清

Khodabukus 前博士后导师、加州大学戴维斯分校的Keith Baar则依靠一种更艰深的处置妄想：将试验室温度飞腾以贮存血清。当血清快要用尽时，他会订购以及魔难至少4批货源，审核它们哺育的细胞的效力，找出与之后试验最立室的。

之后置办100瓶同样的血清。尽管这会破费着实验室2.5万美元，但这也象征着他们能不断试验，不用花数月光阴魔难更多的血清。科罗拉多大学癌症生物学家Matthew Sikora指出，不魔难其血清的钻研者可能陷入省事。

Sikora运用乳腺癌细胞系钻研“弱雌激素”的效应。他置办了经由木炭处置的血清，以便剥离类胆固醇激素以及其余多脂份子。而后他魔难了血清中的细胞含有或者缺少雌激素受体，假如血清中的激素能被实用移除了，那末这些细胞的增值功能理当不同。

去年，他以及共事不患上不停止试验6个月，当时不断批次的血清均无奈抵达着实验目的。差距的荷尔蒙容量会“残缺倾覆”对于一种癌症药物若何使命的批注。Sikora以为，血清中的未知变更能批注他与相助者不能患上到不合下场的原因。

纵然钻研职员妨碍批次魔难，他们也可能不知道理当留意甚么。但奥兰治儿童医院细胞以及发育生物学家Mariella Simon展现，钻研职员永世需要子细。实际上，他们理当豫备短缺的血清完玉成数试验。假如在运用一批新血清时，他们理当确保不试剂爆发变更，并有饶富的就血清妨碍比对于，以防止因血清变更而泛起的怪异服从。

此外，传染也会扰乱试验。最阴险的破损者之一便是支原体。这种重大的细菌能偷偷溜过消毒器的边缘，并能抵御多种抗生素。它能吃掉细胞的营养并能修正DNA及卵白质分解。

传统的支原体魔难需要数周，并仍会遗漏一些罕有菌株。美国方式哺育物珍藏所尺度化使命负责人Yvonne Reid提到，基于聚合酶链反映（PCR）的魔难能更快捷精确地找到谜底。

为了防止血清被传染，一些钻研职员还抉择运用伽马射线。搜罗支原体在内的一些艰深传染物均对于射线颇为敏感。但射线也会伤害卵白质以及生物活性份子的妨碍。良多提供商也提供经由伽马射线映射过的血清，国内血清财富同盟也建树了使命组魔难这些血清的下场。

过错无处不在

细胞的物理情景影响深远。美国波士顿威斯钻研所钻研职员发现，哺育基仅泛起变形以及行动就会修正细胞。差距品牌的试验室器皿能将差距的化学物资释放到哺育基中，并扰乱细胞代谢钻研。

经由子细思考的试剂削减也能以意想不到的方式修正细胞代谢：抗生素能伤害线粒体活性。纵然试验室冰箱的玻璃门也能捣毁钻研，原因是哺育基中的一些化学物资对于光线颇为敏感。 此外， 细胞在给定的哺育皿中的妨碍也不相同。

在这些试验中，细胞自己就酿成最大的变数。英国伦敦大学学院癌症钻研员John Masters指出，不重大快捷的措施能知道细胞是否适宜要求。

美国犹他州细胞哺育照料Leland Foster则以为，“试验室要远离这种变量，需要有业余职员教育。”他指出，哺育细胞最佳由细胞哺育专家妨碍，而非实习生，前者能分说出细胞在“微笑仍是皱眉头”。

在快捷妨碍或者相对于晃动阶段的细胞，其反映并不相同。假如它们在哺育基中的光阴过长，还会爆发其余变更，并影响增殖。纵然能确证细胞的遗传不同性，细胞的其余紧张属性也无奈确证。

Reid提到，由于存在如斯多的不断定性，钻研职员需要一周或者更多光阴优化细胞妨碍，并在试验开始前总结妨碍概况。妨碍概况能见告钻研职员何时收获细胞，何时检测等。

而紧张的是，钻研职员必需光阴坚持小心。“不一套试验规程适宜所有人。”Neve说。但轻忽细胞的钻研职员将会碰着更多难题。“有人的博士学位泡汤了、拨款丢了，致使多少年的使命白干了，原因便是不妨碍重大的品质操作。”Masters说。（张章编译）

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《做作》报道原文（英文）